建立無(wú)菌室浮游菌測試標準操作程序，規范無(wú)菌室浮游菌的檢測。

 

2、范圍

 

適用于無(wú)菌室（包括潔凈工作臺）浮游菌的測試和環(huán)境驗證。

 

3、職責

 

QA、QC人員遵照執行。

 

 

 

4、內容

 

4.1 參考標準：GB/T 16293-2010

 

4.2 測試方法

 

 本測試方法為計數濃度法，即通過(guò)收集懸浮在空氣中的生物性粒子于專(zhuān)門(mén)的培養基（選擇能證實(shí)其能夠支持微生物生長(cháng)的培養基），經(jīng)若干時(shí)間和適宜的生長(cháng)條件讓其繁殖到可見(jiàn)的菌落計數，以判定該無(wú)菌室的微生物濃度。

 

4.3 測試儀器、輔助設備和培養基

 

浮游菌采樣器、培養皿（選用與儀器相適應的培養皿）、培養基、恒溫培養箱、高壓蒸汽滅菌器。

 

4.4  測試狀態(tài)及測試時(shí)間

 

4.4.1 靜態(tài)和動(dòng)態(tài)兩種狀態(tài)均可進(jìn)行測試，靜態(tài)測試時(shí)，室內測試人員不得多于2人。

 

4.4.2 在靜態(tài)a測試時(shí)，單向流無(wú)菌室（區），測試在凈化空調系統正常運行時(shí)間不少于10分鐘后開(kāi)始；非單向流無(wú)菌室（區），測試在凈化空調系統正常運行不少于30分鐘后開(kāi)始。在靜態(tài)b測試時(shí)，單向流無(wú)菌室（區），測試在生產(chǎn)操作人員撤離現場(chǎng)并經(jīng)過(guò)10分鐘自?xún)艉箝_(kāi)始；非單向流無(wú)菌室（區），測試在生產(chǎn)操作人員撤離現場(chǎng)并經(jīng)過(guò)20分鐘自?xún)艉箝_(kāi)始。

 

 

 

4.5  采樣點(diǎn)的確定

 

4.5.1  最少采樣點(diǎn)數目見(jiàn)表1，每次最小采樣量見(jiàn)表2。

4.5.2   采樣點(diǎn)位置布置宜力求均勻，避免采樣點(diǎn)在局部區域過(guò)于稀疏，采樣點(diǎn)按照《潔凈區環(huán)境監控管理規程》附件×××車(chē)間潔凈度監測采樣點(diǎn)布局圖的要求布置，每個(gè)采樣點(diǎn)一般采樣一次。

 

4.5.3工作區采樣點(diǎn)位置離地0.8m~1.5m左右（略高于工作面），送風(fēng)口測點(diǎn)位置離開(kāi)送風(fēng)面30cm左右，可在關(guān)鍵設備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測點(diǎn)。

 

 

 

4.6     測試準備

 

4.6.1   采樣器在進(jìn)入被測區域前先清潔表面，然后用75%酒精消毒一遍或存放于被測區域內，與被測試區域一起消毒（用于A(yíng)級無(wú)菌室的采樣器必須預先放在被測房間內）。

 

4.6.2  A/B級區采用一次性培養皿，其它區域按無(wú)菌操作要求，在中檢室潔凈工作臺上提前制備培養備用（將滅菌后的培養基用水浴溶解，冷卻至約50-60℃，Φ90mm培養皿每個(gè)傾注約20ml培養基，Φ150mm培每個(gè)傾注約30ml培養基），培養皿加蓋后在室溫下放至凝固。自制好的培養皿在無(wú)菌室內存放不超過(guò)48小時(shí)，2~8℃保存的培養皿一般不超過(guò)1周，一次性培養皿在標注的有效期內使用，過(guò)期不得使用。

 

4.6.3  A/B級區使用的培養皿在區域消毒前一次性傳入，隨環(huán)境一起消毒，在消毒液取用間架子上暫存，在有效期內使用。若需臨時(shí)傳入，則必須在前一天臭氧消毒前通過(guò)C級與B級傳遞窗傳入B級區進(jìn)行臭氧消毒，第二天使用。傳入前表面也必須用75%酒精擦拭。其它區域用培養皿按物品傳入要求當天傳入使用。

 

4.6.4  采樣前，先用75%酒精清洗采樣器的頂蓋、轉盤(pán)以及罩子的內外面（FKC型浮游空氣塵菌采樣器用酒精清洗采樣頭）。

 

4.6.5  測試具體操作見(jiàn)“JYQ-Ⅱ型浮游菌采樣器標準操作程序或FKC-1型浮游空氣塵菌采樣器標準操作程序”。

 

4.6.6  采樣結束后，蓋上培養皿蓋子，在培養皿上標注所有信息（包括產(chǎn)品批號，放置位置等），將培養皿用適宜的方式捆扎，倒置于30~35℃恒溫培養箱中培養，培養時(shí)間不少于2天。

 

4.6.7  培養結束后逐個(gè)檢查培養皿，用肉眼對培養皿上所有的菌落直接計數、標記，然后用5~10倍放大鏡檢查，有否遺漏。若培養皿上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上菌落計數。

 

 

 

4.7   測試記錄應包含以下內容

 

4.7.1   被測試區域名稱(chēng)、測試日期、測試依據、測試者姓名、測試儀器及測試方法的描述，測試時(shí)所采用的狀態(tài)和室內測試人員數，采樣點(diǎn)數目，測試次數、采樣流量，測試結果（包括所有統計計算資料）等。

 

4.7.2  若為動(dòng)態(tài)測試，還應記錄現場(chǎng)操作人員數量，現場(chǎng)設備運轉情況等。

 

4.8   結果計算

 

4.8.1  用計數方法得出各個(gè)培養皿的菌落數。

 

4.8.2  每個(gè)測點(diǎn)的浮游菌平均濃度計算按下式進(jìn)行

 

 

 

4.9   結果評定

 

4.9.1  每個(gè)測點(diǎn)的浮游菌平均濃度必須低于所選定評定標準中的界限。

 

4.9.2  在靜態(tài)測試時(shí)，若某測點(diǎn)的浮游菌平均菌濃度超過(guò)評定標準，則應重新采樣兩次，兩次測試結果均合格才能判為符合。

 

4.9.3  若有超過(guò)規定者，必須及時(shí)與生產(chǎn)部門(mén)聯(lián)系，對該區域進(jìn)行消毒或其它處理，然后重新測試至合格。

 

 

 

4.10    日常監控

 

4.10.1  浮游菌日常監控設糾偏限度和警戒限度（限度范圍及取樣頻次見(jiàn)《潔凈區環(huán)境監控管理規程》），以保證無(wú)菌室（區）的微生物濃度受到控制，定期檢測以檢查微生物負荷以及消毒劑的效力，并作傾向分析。靜態(tài)和動(dòng)態(tài)的監控都可以采用該方法。

 

4.10.2  對于浮游菌的取樣頻次，如果出現下列情況應考慮修改，在評估以下情況后，也應確定其他項目的檢測頻次

 

——連續超過(guò)糾偏限度和警戒限度；

 

——停工時(shí)間比預計延長(cháng)；

 

——關(guān)鍵區域內發(fā)現有污染存在；

 

——在生產(chǎn)期間，空氣凈化系統進(jìn)行任何重大的維修；

 

——日常操作記錄反映出傾向性的數據；

 

——消毒規程的改變；

 

——引起生物污染的事故等；

 

——當生產(chǎn)設備有重大維修或增加設備時(shí)；

 

——當無(wú)菌室（區）結構或區域分布有重大變動(dòng)時(shí)。